蛋白质印迹法是由瑞士*弗雷德里希生物研究所（FriedrichMiescherInstitute）的HarryTowbin在1979年提出的。在尼尔·伯奈特（NealBurnette）于1981年所著的《分析生物化学》（AnalyticalBiochemistry）中被称为Western Blot。
蛋白免疫印迹即Western Blot，是将印迹技术与抗原-抗体反应的特异性相结合的检测技术，用于分离和检测生物标本中的某一特定蛋白。其基本原理实混合蛋白质样本通过凝胶电泳分离后，通过特殊虹吸或电场装置印迹至固相介质（NC膜或PVDF膜）上，将针对待测蛋白的特异性抗体作用于滤膜上，利用抗体上偶联的酶降解底物在滤膜上生成有色沉淀物或化学发光产物，从而显示出待测蛋白的存在及量。
在Western Blot中使用内参其实就是在WB过程中另外用内参对应的抗体检测内参，这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达，由于内参在各组织和细胞中的表达相对恒定，借助检测每个样品内参的量就可以用于校正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误差，保证实验结果的准确性。此外使用内参可以作为空白对照，检测蛋白转膜情况是否*、整个Western Blot显色或者发光体系是否正常。
操作程序：
1．总蛋白制备；
2．比色法测定蛋白含量；
3．变性聚丙烯酰胺不连续凝胶电泳(SDS-PAGE)凝胶电泳，分离蛋白质；
4．蛋白质转印电泳印迹法；
5．固相免疫检测：封闭、一抗杂交、二抗杂交；
6．化学发光法检测：显色、曝光、显影定影；
7．结果数据分析：胶片扫描，软件分析；
8．提供实验报告，包括详细的实验方法及免疫印迹实验结果的相关图表。
